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實(shí)驗(yàn)方案
膜蛋白具有多種功能,在細(xì)胞識(shí)別、細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、運(yùn)輸?shù)扔兄兄匾慕巧?,因此也是極佳的藥物靶點(diǎn)。抽提膜蛋白主要是進(jìn)行蛋白組分析:常用的實(shí)驗(yàn)是非變性膠電泳、酶活分析、SDS-PAGE、western blot 等。本文敘述了總蛋白的抽提方法、和膜蛋白的提取方法。 一、從新鮮樣品中提取總蛋白(簡(jiǎn)易法) 1. 自配裂解液(pH 8.5-9.0):50 mM Tris-HCl,2 mM EDTA... 細(xì)胞的來(lái)源多樣,培養(yǎng)方法也各不相同,凡是來(lái)源于胚胎、組織器官及外周血,經(jīng)特殊分離方法制備而來(lái)的原初培養(yǎng)的細(xì)胞稱(chēng)之為原代細(xì)胞。原代細(xì)胞經(jīng)分散接種之手段稱(chēng)為傳代。凡能經(jīng)傳代方式進(jìn)行再次培養(yǎng)的細(xì)胞稱(chēng)為傳代細(xì)胞。若能穩(wěn)定生長(zhǎng)傳至10~20代以上的細(xì)胞可確立為細(xì)胞系。若有條件能開(kāi)展單細(xì)胞克隆、純化,經(jīng)大量擴(kuò)增后所形成的生物學(xué)特性穩(wěn)定的克隆化細(xì)胞群,稱(chēng)之為細(xì)胞株或克隆細(xì)胞。此過(guò)程稱(chēng)為細(xì)胞的純化或細(xì)胞克隆... 多克隆抗體制備兔多克隆抗體制備免疫兩只新西蘭白兔,采用標(biāo)準(zhǔn)免疫程序操作天數(shù)備注免疫0首次免疫 150-500mg/只,與弗氏完全佐劑混合,皮下多點(diǎn)注射21再次免疫 相同劑量與弗氏不完全佐劑混合,皮下多點(diǎn)注射42加強(qiáng)免疫 相同劑量與弗氏不完全佐劑混合,皮下多點(diǎn)注射70加強(qiáng)免疫 相同劑量與生理鹽水混合,耳靜脈注射采血0采集對(duì)照血清,2ml77采集血清2ml,測(cè)效價(jià)78放血,約30-50ml血清/... ELISA KIT開(kāi)發(fā)(Cat#: CSQ006)相關(guān)介紹:四正柏生物可根據(jù)客戶(hù)具體要求進(jìn)行ELISA Kit的開(kāi)發(fā)??刹捎肊LISA夾心法(測(cè)定抗原蛋白)、間接法(測(cè)定抗體)或競(jìng)爭(zhēng)法(測(cè)定小分子化合物)定量檢測(cè)蛋白的含量。 需客戶(hù)提供的材料: 目的蛋白或小分子化合物。 相對(duì)應(yīng)的抗體,如果采用夾心法檢測(cè),需要針對(duì)不同表位的抗體對(duì)(單抗/單抗或單抗/多抗)。 需要做交叉反應(yīng)檢測(cè)的物質(zhì)。 由公司...
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